cdna文库(何谓基因文库何谓cDNA文库,有何优点建库对于分离目的基因有何重要作用)

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何谓基因文库何谓cDNA文库,有何优点建库对于分离目的基因有何重要作用
【答案】:基因文库是指包含某一生物基因组DNA片段的全部克隆。即将整个基因组DNA切成片段,并用合适的载体将全部DNA片段进行克隆。文库中每一个克隆只含基因组中某一特定的DNA片段。cDNA文库是指包含某一生物mRNA的全部cDNA克隆。cDNA文库中的每一个克隆只含一种mRNA信息。cDNA文库的优点:①文库中只含表达基因的cDNA,种类数比基因数少得多,较易筛选到目的基因克隆。②真核生物基因由于含有内含子,在原核生物细胞中不能直接表达。cDNA文库中筛选到cDNA克隆,只要附上原核生物的调节和控制序列,就能在原核细胞内表达。③由于cDNA不含真核生物基因的启动子和内含子,因而其DNA序列比基因短,可选用质粒或噬菌体载体作为克隆载体。微生物的单个基因只占基因组DNA的很小部分,要从中分离某一目的基因,就好比大海捞针,是一项十分艰巨的工作。建库后,利用标记的基因探针进行:DNA杂交,或者用抗体与表达蛋白进行免疫反应,或检测表达蛋白活性,从文库中较易筛选出含目的基因的克隆。
dna文库与cdna文库的异同点
来源不同,组成不同。
1、来源不同:DNA文库是从生物体的基因组DNA中提取出来的,包含了该生物体的全部基因信息。而cDNA文库则是从生物体的mRNA反转录成cDNA后构建的,只包含了该生物体表达的基因信息。
2、组成不同:DNA文库中的DNA片段是随机断裂的,长度不一,没有特定的功能。而cDNA文库中的cDNA片段是由特定的mRNA反转录而来的,具有特定的功能。

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